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该测定基于夹心 ELISA 方法,其中将样品添加到预先涂有针对细胞因子的特异性捕获抗体的 ELISA 条形板上。通过添加化的检测抗体,然后加入与化的抗体结合的链霉亲和素-辣根过氧化物酶 (SA-HRP) 来检测捕获的细胞因子。添加显色酶底物 3,3',5,5' 四甲基联苯胺 (TMB) 会产生有色产物,其强度与样品中的细胞因子浓度成正比。通过与并行分析的细胞因子标准品的连续稀释液进行比较来确定细胞因子的浓度。
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